产品介绍
博士德生产的 EDTA 抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。
EDTA 缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的 IHC 抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。本抗原修复液采用了广泛使用的 EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。 一个包装的本产品可以配制成 1000 毫升抗原修复液(1X)。按照每张标本需10ml 抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品约可用于 100 个样品。
使用说明
本产品为10X的浓缩液体包装，使用前需用重蒸水稀释10倍，配制成1X的EDTA抗原修复液的工作液（PH8.0）1. 对于石蜡切片：
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗，蒸馏水洗。
④ 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
产品用途
用于组化或免疫荧光实验中的抗原修复（微波热修复或高压热修复）。
文献引用格式
EDTA抗原修复液(10X) (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR0023)
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