产品介绍
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，对细胞的毒性较低,常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也常用于普通的细胞核染色，或常规的 DNA 染色。 Hoechst 33342 的最大激发波长为 346nm，最大发射波长为 460nm；Hoechst 33342 和双链 DNA 结合后，最大激发波长为 350nm，最大发射波长为 461nm。
使用说明
1.对于固定的细胞或组织：
a.对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b.对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst 33342 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。室温放置3-5 分钟。
c.吸除 Hoechst 33342 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次3-5 分钟。d.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2.对于活细胞或培养的组织：
a.加入适当量 Hoechst 33342 染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入 1ml 染色液，对于 96 孔板一个孔需加入 100 微升染色液。
b.在适宜于细胞培养的温度培养 20-30 分钟。弃染色液，用 PBS 或培养液洗涤2-3 次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
产品用途
普通的细胞核染色，或常规的 DNA 染色。
注意事项
1.荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
3.若发现染色后荧光太强，可将原染色液用 PBS 做适当稀释后再使用。
文献引用格式
Hoechst 33342染色液 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR0039)
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