产品介绍
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也常用于普通的细胞核染色或常规的DNA染色。 Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
使用说明
本产品为工作液，可直接使用。
1. 对于固定的细胞或组织：
a.对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的即用Hoechst 33258染色。
b.对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或培养的组织：
a. 加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。细胞发生凋亡时，在荧光显微镜下观察会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
产品用途
本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
注意事项
1. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(AR1109)可以向博士德订购。
3. Hoechst 33258对人体有害，请注意适当防护。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
文献引用格式
Hoechst 33258染色液 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR1169)
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