产品介绍
BrdU是一种合成的胸苷溴化类似物, 在S期可替代胸苷选择性插入细胞DNA。BrdU通常和广泛用于测定DNA合成和标记分裂细胞,最后用来研究诱导细胞增殖的信号通路和其他生理过程。BrdU通过体外细胞培养或体内注射的方式进行探针加载,然后用抗BrdU的抗体进行特异性检测。BrdU标记后,对组织或细胞进行固定和透化后,需要额外的DNA水解步骤(有时也称DNA变性),从而允许抗BrdU的抗体能够与插入DNA的BrdU结合。BrdU抗体能够与其他细胞标记物如Ki67,双皮质素(DCX)和NeuN联合使用来鉴定增殖细胞和新分化神经元。
使用说明
在1M的氢氧化铵中的溶解度为50mg/ml;也可以溶于DMF、DMSO,溶解度在50-100 mg/mL。0.16 - 500 mg/mL的Brdu可以抑制胚胎肾细胞细胞的生长,1.0 mg/mL有较强的抑制作用。在免疫组化中的应用:BrdU标记细胞免疫组化染色(SP法),BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中,以标记DNA。通过流式检测BrdU的掺入量可以从单个细胞水平评价DNA合成细胞频率。用于在单细胞水平检测功能性激活,即同时检测DNA合成、细胞表面激活抗原表达以及胞内细胞因子分泌。包括在BrdU存在下培养激活的单个核细胞,固定通透后,以抗BrdU荧光抗体检测BrdU的摄取。同时,以适宜浓度的DNA酶使胞内DNA变性,加强掺入BrdU与抗体的亲和力,同时保留胞内蛋白结构和荧光素荧光强度。此方法避免了DNA变性条件与胞内及表面标志同时检测条件的冲突。持续的BrdU的掺入可以用于确定和分析处于DNA合成活跃状态的细胞,区分于那些处于静止期的细胞,从而进行细胞增殖比例的分析;另一方面,不同时间点加入BrdU,可以分析细胞周期动力学。
BrdU掺入研究已在很多实验中得到广泛开展,包括体外和体内标记实验。
注意事项
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
文献引用格式
BrdU (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#ED1100)