产品名称
浓缩型SABC-DyLight488(POD)(人IgG)试剂盒
规格/价格
1/5Kit/520 2/5Kit/980 Kit/2100
产品介绍
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质，分子量60000。同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍。等电点接近中性，这些特点使链霉亲和素的非特异吸附很低。因该方法的中心是StreptAvidin-Biotin-enzymeComplex,故命名为SABC。SABC兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。免疫组化双显色试剂盒采用荧光素488+过氧化物酶POD标记的链酶亲和素（SABC-DyLight488+POD）。DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）和特异性，对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮，但背景更低。DyLight488最大吸收峰493nm；最大发射峰518nm。呈黄绿色。加入显色底物DAB显示后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
试剂盒内容
| 试剂盒组分 | 体积 | 稀释比 | 用途 | 保存条件 |
|---|
| 正常兔血清封闭液 | 1ml/2ml/5ml | 1:10 | 用于组织切片的封闭 | 4℃可保存一年，应避免冷冻。 |
| 生物素化兔抗人 IgG | 0.1ml/0.2ml/0.5ml | 1:100 | 生物素化兔抗人 IgG |
| SABC-DyLight 488 | 0.1ml/0.2ml/0.5ml | 1:200-800 | SABC-DyLight 488 荧光染料 |
| SABC-POD | 0.1ml/0.2ml/0.5ml | 1:100 | 链霉亲和素-过氧化物酶复合物 |
| 注：另有四个滴瓶供稀释试剂用。稀释试剂推荐用0.02M PBS。 |
产品用途
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质，分子量60000。同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍。等电点接近中性，这些特点使链霉亲和素的非特异吸附很低。因该方法的中心是StreptAvidin-Biotin-enzymeComplex,故命名为SABC。SABC兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。免疫组化双显色试剂盒采用荧光素488+过氧化物酶POD标记的链酶亲和素（SABC-DyLight488+POD）。DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）和特异性，对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮，但背景更低。DyLight488最大吸收峰493nm；最大发射峰518nm。呈黄绿色。加入显色底物DAB显示后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
需要自备的试剂
1．粘片剂APES或POLY-L-LYSINE（博士德公司有售）。
2．免疫组化专用PBS（pH7.2-7.6）配法：1000ml蒸馏水中加氯化钠8.5g, Na2HPO 42.8g, NaH2PO 40.4g。如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。
3．0.01M枸橼酸盐缓冲液：1000ml蒸馏水中加枸橼酸三钠（C6H5Na3O7·2H2O）3g,枸橼酸(C6H8O7·H2O)0.4g。
4．DAB显色试剂盒（博士德公司有售）。
使用说明
免疫组化染色程序的选择：用户需根据抗原/抗体的特点确定程序，多数情况下要先比较各程序染色结果。
A程序：石蜡切片热修复抗原程序。促进某些位于蛋白质内部的位点暴露。
B程序：石蜡切片酶消化程序。促进某些被固定遮避的抗原位点暴露。
C程序：石蜡切片不消化/不修复程序。适于稳定的抗原。
D程序：细胞涂片，冰冻切片染色程序。
A.石蜡切片微波修复抗原染色程序:
1.载玻片防脱片剂处理：可选择APES或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60℃ 30-60分钟以使切片紧密粘附。
2.切片脱蜡至水。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
4.滴加0.02M PBS 1：10稀释的正常血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，不洗。
5.滴加0.02M PBS 适当稀释的一抗，20-37℃ 1~2小时或4℃过夜。0.02M PBS 洗2分钟×3次。
6.滴加0.02M PBS 1：100稀释的和一抗相对应的生物素化二抗，20-37℃30分钟。0.02M PBS 洗2分钟×3次。
7.滴加0.02M PBS 1：200-800稀释的DyLight488-SABC，20-37℃ 30分钟。0.02M PBS 洗5分钟×4次。
8.水溶性封片剂封片。荧光显微镜观察。
血涂片，细胞和冰冻切片染色程序：
1.载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案首选4%多聚甲醛或10%福尔马林固定60-90分钟。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
其余步骤和石蜡切片4-8步相同。
文献引用格式
浓缩型SABC-DyLight488(POD)(人IgG)试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SA1035)
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