产品名称
浓缩型DyLight594-SABC(小鼠IgM)试剂盒
规格/价格
1/5Kit/480 2/5Kit/900 Kit/2000
产品介绍
SABC是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）和特异性，对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，标记的抗体比Cy3和FITC标记的更亮，但背景更低；DyLight594-SABC，将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight594最大吸收峰618nm；最大发射峰593nm。呈红色。
试剂盒内容
| 试剂盒组分 | 体积 | 稀释比 | 用途 | 保存条件 |
|---|
| 正常浓缩山羊血清封闭液 | 2ml/4ml/10ml | 1:10 | 用于组织切片的封闭 | 4℃可保存一年，应避免冷冻。 |
| 生物素标记羊抗小鼠 IgM | 0.2ml/0.4ml/1ml | 1:100 | 生物素标记羊抗小鼠 IgM |
| SABC-DyLight 594 | 0.2ml/0.4ml/1ml | 1:200-800 | SABC-DyLight 594 荧光染料 |
| 注：另有三个滴瓶供稀释试剂用。稀释试剂推荐用0.02M PBS。 |
需要自备的试剂
1．粘片剂APES或POLY-L-LYSINE（博士德公司有售）。
2．EDTA修复液（博士德公司有售）。
3．0.02M PBS（pH7.2-7.6）配法：1000ml蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O7g,NaH2PO4·2H2O0.5g。
4．0.01M枸橼酸盐缓冲液：1000ml蒸馏水中加枸橼酸三钠（C6H5Na3O7·2H2O）3g，枸橼酸(C6H8O7·H2O)0.4g。
使用说明
石蜡切片染色程序:
1.载玻片防脱片剂处理：可选择APES或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60℃ 30-60分以使切片紧密粘附。
2.切片脱蜡至水。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
4.滴加0.02M PBS 1：10稀释的正常血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，不洗。
5.滴加0.02M PBS 适当稀释的一抗，20-37℃ 1~2小时或4℃过夜。0.02M PBS 洗2分钟×3次。
6.滴加0.02M PBS 1：100稀释的和一抗相对应的生物素化二抗，20-37℃ 30分钟。0.02M PBS 洗2分钟×3次。
7.滴加0.02M PBS 1：200-800稀释的DyLight594-SABC，20-37℃30分钟。0.02M PBS 洗5分钟×4次。
8.水溶性封片剂封片。荧光显微镜观察。
血涂片，细胞和冰冻切片染色程序：
1.载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案首选4%多聚甲醛或10%福尔马林固定60-90分钟。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
其余步骤和石蜡切片4-8步相同。
文献引用格式
浓缩型DyLight594-SABC(小鼠IgM)试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SA1110)
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