增强型蛋白印迹膜再生液

100ml/100

4℃保存，一年有效。

使用方法： 注：膜可以4℃保存在PBS或TBS中，直到可以进行剥离程序。 1.将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。 2.用TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。 3.将印迹膜放入再生液中，室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿（对于8×10cm印迹需要约20mL）。 注意：优化孵化时间和温度对于获得最佳结果是必不可少的。对于一般抗体，室温孵育就足够了。然而，高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。 4.用TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。 5.按如下方法检测： A.完整去除二抗的测试：将膜进行发光检测，如果5分钟内未检测到信号，则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。 B.完整去除一抗的测试：用封闭液封闭膜，用HRP标记的二抗孵育膜，然后用洗涤缓冲液洗涤，进行发光检测，如果5分钟内没有检测到信号，则已经成功地将一抗从抗原中除去。 6.如果在步骤5中检测到信号，则返回步骤2，再剥离5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体，同时防止对抗原的损伤。 7.确定膜被适当剥离后，可以进行第二次免疫印迹实验。 注意：1.印迹可以剥离和重复检测多次，但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。如果抗原在再生液中变得不稳定，随后的反应可能导致信号降低。 2.剥离后建议重新封闭印记膜。

1.可重复使用硝酸纤维素膜或PVDF膜，通过不同的一抗检测不同的标靶 2.可重新检测印迹，改正或优化初次实验中无效的抗体浓度

注意事项：1.刚从低温保存中拿出来会出现SDS的沉淀，建议温水溶解再使用。 2.建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白。 3.本品适用于NC膜和PVDF膜，推荐使用PVDF膜，效果更佳。 4.本产品适用于HRP标记的二抗，且用化学发光法检测的印迹膜。

增强型蛋白印迹膜再生液 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR0196)