Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)

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Cell Counting Kit-8（简称 CCK-8）试剂盒广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高 灵敏度检测，它对细胞无明显毒性，在电子载体的作用下被细胞线粒体中的一些脱氢酶 还原生成橙黄色的 formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色 越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有 WST-8 的 CCK-8 溶液，无 须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块 96 孔板内完成。 不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解 formazan。可以用于大批量 样品的检测。

4℃避光保存，一年有效。

1.第一次做实验时，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养 时间。
2.接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不 一致。
3.培养板周围一圈孔培养液容易挥发，为减少误差，建议培养板周围的四边每孔只加 培养基。
4.建议采用多通道移液器，减少平行孔间的误差，加 CCK-8 时，建议斜贴着培养板壁 加，不要插到培养基液面下加，容易产生气泡，干扰 OD 值。
5.若细胞培养时间较长，培养基颜色或 PH 发生变化，建议更换培养基后再加 CCK-8，含有酚红的培养基不影响测定。
6.CCK-8 对细胞的毒性非常低，其他的实验，例如中性红法或结晶紫法，也可在 CCK-8 法检测完后继续进行。
7.可以使用大于 600nm 的波长，例如 650nm，作为参考波长进行双波长测定，CCK-8 在 参比波长处没有吸光值，设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。
8.如果实验中待测物质有氧化还原剂，在不含细胞的培养基中加入药物，然后加入 CCK-8 试剂在一定时间内检测，和不加药物的培养基进行比较(只加 CCK-8 试剂)，如果 O.D 值明显偏高，则说明有反应。
9.加 CCK-8 试剂时速度要快，减少试剂在移液器上的残留，加入 CCK-8 试剂后轻轻震培 养板，为了避免加样时由于 CCK-8 残留在枪头上所带来的误差，可以在加样前用培养稀释 CCK-8 试剂并混匀后加样。
10.CCK-8 反复冻融会增加背景值，干扰实验测定。