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多聚体抗小鼠IgG-HRP

SV超敏两步法试剂盒

说明书

SV0001

  • 3ml ¥260 6ml ¥420 12ml ¥760 50ml ¥2880 100ml ¥5580
  • 货期: 现货
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产品名称
多聚体抗小鼠IgG-HRP
规格/价格
3ml/260元(40~50张)
6ml/420元(80~100张)
12ml/760元(160~200张)
50ml/2880元
100ml/5580元
产品介绍
博士德公司根据市场及客户需求,以独特配方生产的两步法免疫组化检测试剂盒— Super Vision( SV)系列,Super Vision 两步法免疫组化试剂盒是博士德独立研究的高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物,替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。
试剂盒内容
组分规格
5% BSA 封闭液3ml/6ml/12ml/50ml/100ml
聚合 HRP 标记抗小鼠 IgG3ml/6ml/12ml/50ml/100ml
3% H2O23ml/6ml/12ml/50ml/100ml
需要自备的试剂
免疫组化专用PBS,显色剂,苏木素,封片剂。
使用说明
A.石蜡切片染色程序:
1.载玻片防脱片剂处理:可选择 APES 或 Poly-Lysine。捞片后置烤箱 58-60 ℃ 30-60分钟以使切片紧密粘附。
2.切片脱蜡至水。
3.3%H2O2,室温 10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗 2分钟 × 3次。
4.根据抗原抗体情况,必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。
5.滴加封闭液,室温 10 分钟。甩去多余液体, 不洗。
6.滴加适当稀释的一抗(小鼠 IgG),20-37 ℃ 1~2 小时或 4℃过夜。0.01M PBS 洗 2 分钟 × 3次。(一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
7.滴加聚合HRP标记抗小鼠 IgG(SV-0001),37℃孵育 30分钟,PBS 或 TBS 冲洗,2分钟×3次。
8.DAB显色:按 100ml 0.02M PBS 或 TBS 中加入最终浓度为 25-50mgDAB,0.03%的 H2O2。或使用 DAB显色试剂盒(AR1022)。取 1ml 蒸馏水,加试剂盒中 A,B,C 试剂各 1 滴,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般 5-30 分钟。蒸馏水洗涤。
9.苏木素轻度复染、脱水,透明,封片、观察。B.血涂片,细胞和冰冻切片染色程序
1.载玻片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine)。抗凝血经分层离心后涂片;培养细胞也可涂片或贴片生长;冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案用 4%多聚甲醛 或 丙酮固定 10-20 分钟。
3.3%H2O2 1份 + 纯甲醇 4份 混合,室温孵育 30分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。其余步骤和石蜡切片 5-9 步相同。如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复,方法和石蜡切片 4-9 步相同。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(AR0024)、EDTA 抗原修复液(AR0023)、PBS 缓冲液(AR0030)、TBS 缓冲液(AR0031)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(AR0022)、抗原修复液Ⅰ(AR0026,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(AR1007)、胃蛋白酶(AR1008)消化组织。

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