产品介绍
本品包含了封闭试剂,HRP标记羊抗小鼠IgG以及ECL发光底物,适于一抗为小鼠IgG的Western Blotting检测。
试剂盒内容
产品组成 | 产品体积/数量 |
蛋白干粉 | 10g |
HRP标记羊抗小鼠IgG(效价1:5000-10000) | 0.1ml |
超敏ECL A液 | 100ml |
超敏ECL B液 | 1000ml |
使用说明
1.配置封闭液:将10g蛋白干粉溶于200ml 1×TBS-T 缓冲液中即可,配制好的封闭液需 4℃保存,可于一周内使用。
2.稀释二抗:将HRP标记羊抗小鼠IgG按照1:5000-10000的比例溶于配置好的封闭液中。
3.转印完成后,用TBS-T将膜洗涤3次,每次10min,
4.室温封闭膜60分钟,同时摇动。
5.去除封闭液并添加一抗,在室温振荡孵育1小时或在2-8℃振荡过夜。
6.用TBS-T将膜洗涤3次,每次10min
7.在室温下孵育二抗1小时,同时摇动。
8.用TBS-T将膜洗涤3次,每次10min。
9.混合等量的超敏ECL A和超敏ECL B来制备底物工作溶液。每平方厘米膜使用0.1mL工作溶液。在室温下孵育印迹膜1-2分钟。
10.将印迹膜放在透明的保鲜膜或保护膜中。使用吸收性的纸巾去除多余的液体,小心地将气泡压出。
11.将印迹膜放在X光胶片或成像系统上显色。底物孵育后的30分钟内,发光最强烈。
注意事项
1.NaN3会抑制HRP的活性,检测系统应避免使用.
2.为了您的安全,请穿实验服并佩戴一次性手套。
文献引用格式
ECM Kit(小鼠IgG) (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#EK1001)