超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒
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SH3002

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超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒

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96T|380元

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超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD，EC 1.15.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物体内重要的抗氧化酶。SOD能够催化超氧阴离子自由基（O₂·⁻）发生歧化反应，生成H₂O₂和O₂，在机体氧化与抗氧化平衡中起关键作用。
本试剂盒采用WST-8显色法：黄嘌呤氧化酶（XO）催化黄嘌呤氧化产生超氧阴离子自由基（O₂⁻·），WST-8与O₂⁻·反应生成水溶性的橙黄色甲臜产物，该产物在450 nm波长处有特征吸收峰。SOD可清除O₂⁻·，从而抑制甲臜的形成。反应液颜色越深，说明SOD活性越低；颜色越浅，说明SOD活性越高。通过测定450 nm处吸光度的变化，计算SOD对O₂⁻·的抑制率，即可得出SOD酶活性。

试剂盒内容

试剂名称	规格	保存条件	备注
提取液	液体100mL×1瓶	4℃保存
试剂一	液体15mL×1瓶	4℃保存
试剂二	液体1mL×1支	4℃保存
试剂三	液体1.1mL×1支	4℃避光保存
试剂四	液体200μL×1支	-20℃保存	若凝固，可在25℃水浴温育片刻至全部融解，分装后-20℃保存。临用时取20μL至一个新EP管中，加入480μL试剂一稀释，现配现用。

使用说明

正式实验前务必选取2-3个预期差异较大的样本做测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、样本制备：

①组织样本：称取约0.1g组织（水分充足的样本可取0.5g），加入1mL 提取液，进行冰浴匀浆，在4℃ 12000g离心10min，取上清，置冰上待测。

【注】若增加样本量，可以按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例进行提取。

②细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

③液体样本：直接检测，若浑浊，离心后取上清检测。

2、上机检测

①酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。

②测试前将试剂一、三和四25℃水浴5min以上。

③用排枪操作，以减少各孔间因加入试剂时间先后导致的误差。

④在96孔板中依次加入：

试剂名称（μL）	样本管	样本对照管（可选做）	空白管1 （仅做一次）	空白管2 （仅做一次）
试剂一	150	150	150	150
试剂二	10		10
蒸馏水		10	20	30
样本	20	20
试剂三	10	10	10	10
试剂四	10	10	10	10
充分混匀，室温（25℃）避光静置30min（准确时间）后，在450nm处测定各管吸光值A

【注】：1、若样本数量较多，测定前可将试剂一、三和四按照150μL:10μL:10μL比例混成一个混合液（需依据每次检测的样本数量来混合对应的试剂量），每孔务必最后一步加170μL该混合液。

2、样本对照管：提取后样本颜色较深：如棕褐色或黄色，或A对照管值>0.1，可做此管，否则抑制率偏低，即SOD活性偏低。若为相同样本可做一组样本对照管，若每个样本都做对照管，则该试剂盒由原来可测96样变为48样。

3、若样本管数值较低，可能是：①试剂四没有现配现用；②没有按顺序加试剂；③反应温度需室温（25℃）。

文献引用格式

超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SH3002）

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