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丙二醛(MDA)检测试剂盒

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SH3003

  • 96T ¥380
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产品名称
丙二醛(MDA)检测试剂盒
规格/价格
96T|380元
产品介绍
丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是脂质过氧化的最终产物,其含量可以反映细胞或组织受自由基攻击的严重程度,是衡量氧化应激和膜系统受损程度的重要指标。
丙二醛在高温和酸性条件下,与硫代巴比妥酸(Thiobarbituric Acid, TBA)发生缩合反应,生成红棕色产物,该产物在532 nm波长处有特征吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。
试剂盒内容
试剂名称规格保存条件备注
提取液液体 100mL×1瓶4℃保存
工作液液体 30mL×1瓶4℃避光保存若有沉淀析出,50℃ 水浴至溶解。溶解后一个月内使用完毕可室温避光保存,长期保存则需 4℃ 避光保存(保存期间若有沉淀析出,可再次 50℃ 水浴至溶解待用)。
标准品液体 1mL×1支4℃保存
使用说明
正式实验前务必选取2-3个预期差异较大的样本做测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!

1、样本制备:

①组织样本:
称取约0.1g组织(水分充足的样本可取0.5g),加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,在4℃、12000g条件下离心10min,取上清,置冰上待测。

【注】若增加样本量,可以按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取。

②细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例进行提取(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液)。超声波破碎细菌或细胞,超声条件为:冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次;随后在4℃、12000g条件下离心10min,取上清,置冰上待测。

③液体样本:
直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

2、上机检测

酶标仪预热30min以上,同时将水浴锅加热至90~95℃。

②在EP管中依次加入:

试剂名称(μL) 样本管 标准品管
工作液 300 300
样本 200
标准品 200

混匀后,在90~95℃水浴中保温30min,管口用封口膜封紧或用重物压实。取出后置于冰上冷却,在25℃、8000g条件下离心10min,取200μL上清液加入96孔板中,分别于532nm和600nm处读取吸光度A。

ΔA=A532-A600

【注】若样本量极少,如血清样本,可减少加样体积V1(例如由200μL减少至25μL),并用生理盐水或蒸馏水补足至200μL。改变后的加样体积V1需重新代入公式进行计算。
文献引用格式
丙二醛(MDA)检测试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SH3003)

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