超氧阴离子（OFR）含量检测试剂盒
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SH3009

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超氧阴离子（OFR）含量检测试剂盒

规格/价格

96T|380元

产品介绍

超氧阴离子（Oxygen Free Radical，OFR）是生物体内最常见的活性氧之一，在信号传导、免疫防御等生理过程中发挥重要作用。当生物体遭受外界胁迫时，体内代谢失衡会导致超氧阴离子等活性氧爆发性积累。通过准确测定其含量，不仅可以量化氧化和细胞损伤的严重程度，还能直观反映生物体自身抗氧化防御系统的激活状态与清除效率等特性。
超氧阴离子在酸性条件下能将羟胺氧化为亚硝酸根离子（NO₂⁻）。生成的NO₂⁻在酸性介质中与对氨基苯磺酸和α-萘胺反应，生成粉红色的偶氮染料。该产物在540 nm波长处有特征吸收峰，在特定浓度范围内，吸光度值与超氧阴离子的含量成正比。

试剂盒内容

试剂名称	规格	保存条件	备注
提取液	液体100mL×1瓶	4℃保存
试剂一	液体10mL×1瓶	4℃避光保存
试剂二	液体10mL×1瓶	4℃避光保存	临用前，可依据待测样本数量，把试剂二和试剂三等体积混合成无色的反应mix（注意观察，若变粉色，则不能使用）。两天之内用完。
试剂三	液体10mL×1瓶	4℃避光保存	临用前，可依据待测样本数量，把试剂二和试剂三等体积混合成无色的反应mix（注意观察，若变粉色，则不能使用）。两天之内用完。
标准品	液体1mL×1支	4℃保存	用蒸馏水稀释1000倍，现配现用。

使用说明

正式实验前务必选取2-3个预期差异较大的样本做测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、样本制备

①组织样本：称取约0.1g组织（水分充足的样本可取0.5g），加入1mL 提取液，进行冰浴匀浆，在4℃ 12000g离心10min，取上清待测。

【注】若增加样本量，可以按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例进行提取；提取液尽快测定，请勿将样品长时间低温保存，以免影响测定结果。

②细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000g 4℃离心10min，取上清待测。

③液体样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。

2、上机检测

①酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm。

②在EP管中依次加入：

试剂名称（μL）	测定管	空白管（仅做一次）
样本	100
提取液		100
试剂一	100	100
混匀，37℃反应10min
反应mix	200	200
混匀， 37℃反应5min（准确时间）后，立即取出200μL至96孔板中（若浑浊可于8000g室温下离心5min后取200μL上清液），在540nm处测吸光值，ΔA=A测定管-A空白管

文献引用格式

超氧阴离子（OFR）含量检测试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SH3009）

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