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氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒

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SH3010

  • 96T ¥580
  • 货期: 现货
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产品名称
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒
规格/价格
96T|580元
产品介绍
氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽(GSH)的氧化产物,GSSG与GSH的比率直接反映了细胞清除活性氧(ROS)的能力与氧化损伤的程度。当机体受到内源或外源氧化胁迫时,GSH被大量消耗以中和自由基,导致GSSG积累,因此GSSG升高通常指示氧化还原平衡被打破。
本试剂盒首先使用掩蔽剂与样本中原有的GSH特异性反应,去除GSH干扰。随后,在谷胱甘肽还原酶(GR)催化下,GSSG被NADPH还原生成GSH,新生成的GSH与DTNB反应生成黄色产物。通过测定412 nm处黄色产物的吸光度,与标准曲线比较,即可计算样本中GSSG的含量。
试剂盒内容
试剂名称规格保存条件备注
提取液液体100mL×1瓶4℃保存
试剂一液体2mL×1支4℃保存
试剂二粉剂×2支-20℃保存用前甩几下或4℃离心使试剂落入试管底部,每支加1mL蒸馏水溶解备用。用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融,一星期内用完。
试剂三液体1mL×1支4℃避光保存若凝固,可在25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
试剂四液体20mL×1瓶4℃保存
试剂五液体1mL×1支4℃保存
标准品粉体×2支4℃保存若需要做标曲,则用到该试剂
使用说明
正式实验前务必选取2-3个预期差异较大的样本做测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!

1、样本制备:

①组织样本:称取约0.1g组织,加入1mL 提取液,进行冰浴匀浆,在4℃ 12000g离心10min,取上清待测。

【注】若增加样本量,可以按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取。

②细菌/细胞样本:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心10min,取上清待测。

③液体样本:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。

2、上机检测

①酶标仪预热30min以上,调节波长至412nm。

②加入试剂一时,请务必全部加入到样本液体中;若批量测定则试剂二、三、四、五可按照10:10:130:10配成混合液,按照160μL加样量操作。

③在96孔板中依次加入:

试剂名称(μL)测定管
样本20
试剂一20
混匀,室温(25℃)孵育10min。
试剂二10
试剂三10
试剂四130
试剂五10
混匀,室温(25℃)下,立即在412nm处测吸光值A1,10min后测吸光值A2,ΔA=A2-A1

文献引用格式
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SH3010)

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