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多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒

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SH3017

  • 96T ¥580
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产品名称
多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒
规格/价格
96T|580元
产品介绍
多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO,EC 1.14.18.1)广泛存在于植物组织中,是导致果蔬酶促褐变的关键酶。PPO催化酚类底物氧化生成邻醌,邻醌进一步聚合形成褐色色素,严重影响果蔬的色泽和品质。
本试剂盒采用邻苯二酚比色法:PPO催化邻苯二酚(儿茶酚)氧化生成邻醌类化合物。邻醌在420nm波长处有特征吸收峰,在特定浓度范围内,吸光度增加值与PPO活性成正比。
试剂盒内容
试剂名称规格保存条件
提取液液体100mL×1瓶4℃保存
试剂一液体20mL×1瓶4℃保存
试剂二液体1mL×1瓶4℃避光保存
使用说明
正式实验前务必选取2-3个预期差异较大的样本做测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!

1、样本制备:

①组织样本:称取约0.1g组织(水分充足样本可取0.5g),加入1mL 提取液,进行冰浴匀浆,在4℃ 12000g离心10min,取上清,置冰上待测。

【注】若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10的比例进行提取。

②果实样本(水分含量高的果实):称取约1g果实组织样本,加入经预冷的5mL纯乙醇,冰浴匀浆(保证乙醇在整个匀浆液中体积80%以上),低温(可放冰上或4℃冰箱)放置10min;4℃ 12000g离心10min;弃上清,留沉淀。再向沉淀中加入经预冷的5mL纯乙醇混匀,4℃放置10min;4℃ 12000g离心10min;弃上清,留沉淀。最后向沉淀中加入1mL经预冷的提取液,涡旋混匀,4℃ 12000g离心10min,取上清液置于冰上待测。

③液体样本:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。

2、上机检测

①酶标仪预热30min以上,调节波长至420nm。

②所有试剂解冻至室温(25℃)或于水浴锅(25℃)中孵育15-30min。

③在96孔板中依次加入:

试剂名称(μL)测定管
样本50
试剂一140
试剂二10
混匀,立即于420nm处读取各管吸光值A1,5分钟后读取A2,ΔA=A2-A1。

文献引用格式
多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SH3017)

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