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ELISA标准曲线ELISACalc绘制方法

时间:2023-10-16


点击直接下载软件:ELISACalc.rar

ELISA 标准曲线可采用不同的绘图软件来绘制 ,我公司推荐使用的“ELISACalc”软件,以双抗夹心法的一组数据为例,绘制方法如下 :

1、在EXCEL表格中整理一组包括标曲和样本数据。

标准品

样本OD

浓度pg/ml

OD值

0

0.0323

0.5227

0.5287

0.6105

156

0.1004

0.6302

0.6404

0.875

312

0.2003

0.4723

0.4829

0.4271

625

0.3464

0.4992

0.5065

0.9242

1250

0.5472

0.6473

0.6524

1.2026

2500

0.8945

0.4999

0.5069

0.8086

5000

1.3647

1.2535

1.2665

0.9042

10000

1.9448

1.5922

1.5855

0.8102


2、打开软件ELISACalc,复制表格中底色填充为粉色的数据,点击软件中的“粘贴”按钮,如图:


3、左上角优先选择四参数拟合曲线,点击“回归/拟合”模型,得到如下曲线图:


4、曲线应为平滑上升趋势,r2值越接近 1 拟合度越好。如果四参数模型不理想可以换成其他的模型。依次点击“回归方程”“复制”,可以把方程粘贴到表格中。



5、点击“由Y计算X”,复制表格中的样本吸光值即底色为黄色的数据,在软件中点击“粘贴”“计算”。即可得到对应的样本蛋白浓度值。



6、点击“复制”,即可把得到的浓度值粘贴到表格中。整理数据,再乘以稀释倍数,得到对应样本蛋白最终浓度值。

ELISACalc软件与CurveExpert相比较,能选取的拟合模型种类较少,优点是操作简单,可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴,计算大批量数据时有明显优势。

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